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Tipo de Mídia:
Texto
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Formato:
.pdf
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Tamanho:
1.15
MB
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Título: |
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Avaliação (in vitro e ex vivo ) da ação da Frutose-1, 6-Bisfosfato sobre a atividade das enzimas E-ntpdase e Ecto-5'-Nucleotidase em plaquetas de ratos hígidos e sépticos |
Autor: |
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Luiz Claudio DAvila
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Categoria: |
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Teses e Dissertações |
Idioma: |
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Português |
Instituição:/Parceiro |
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[cp] Programas de Pós-graduação da CAPES
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Instituição:/Programa |
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PUC/RS/BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR |
Área Conhecimento |
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BIOFÍSICA |
Nível |
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Mestrado
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Ano da Tese |
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2006 |
Acessos: |
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1,519 |
Resumo |
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A frutose1,6bisfosfato (Fru1,6P2) é um metabólito intracelular natural da rota glicolítica celular. Este monossacarídeo bisfosforilado vem sendo usado experimentalmente por muitos pesquisadores em diversos modelos animais de isquemiareperfusão,
inflamação e sepse. Nos anos 90, Cavallini e colaboradores [23] demonstraram que a Fru1,6P2 inibe, in vitro , a ativação plaquetária e Akimitsu et al. [24] observaram, num modelo de aderência leucocitária pósisquêmica, que tanto a Fru1,6P2 quanto a adenosina apresentavam o mesmo efeito antiisquêmico. Mais recentemente, Chu et al. [25] demonstraram, num modelo de lesão pulmonar, que a coadministração de promazine, um inibidor não seletivo da ATPdiphosphohydrolase, inibia completamente os efeitos observados com a Fru1,6P2. A ATPdiphosphohydrolase é uma ectoenzima
da família das ENTPDases que em conjunto com a ecto5 nucleotidase (Ecto5 NT) hidrolisam seqüencialmente o ATP até a adenosina. Neste trabalho, propõese a hipótese de que os efeitos benéficos observados com a administração da Fru1,6P2 poderiam ser devido a uma modulação da atividade específica de uma destas duas enzimas, ou de ambas. Preparados de plaquetas lavadas e purificadas foram obtidos de ratos hígidos e
sépticos através de centrifugação diferencial e incubados em meio de reação, tamponado com TrisHCl, tendo ATP, ADP ou AMP como substrato. A hidrólise dos nucleotídeos foi determinada in vitro sob concentrações de 0,0 mM (controle sem fru1,6P2), 2,0 mM e 4,0 mM de Fru1,6P2 e ex vivo com plaquetas de ratos sépticos e sépticos tratados, pela viaintraperitonial, com 1,0 mL de Fru1,6P2 a 17% (p/v) (480680 mg/kg de peso corpóreo). Os valores obtidos nos ensaios in vitro , com plaquetas de ratos hígidos submetidas a meios de reação contendo 2,0 mM e 4,0 mM de Fru1,6P2, não apresentaram diferenças significativas quando comparados aos obtidos do controle, sem o monossacarídeo bisfosforilado. Os dados obtidos nos ensaios ex vivo, com plaquetas de ratos sépticos tratados e não tratados com a Fru1,6P2, também não revelaram alterações significativas em relação ao controle SHAM. Estes dados sugerem que os resultados antiagregantes, antiisquêmicos e antiinflamatórios, previamente observados com a Fru1,6P2, não devem ter ser sido produzidos por um efeito modulador sobre a atividade das enzimas ENTPDase e Ecto5 NT em plaquetas. |
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