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Título:  
  Expressão em Escherichia coli de quitinase (E.C. 3.2.1.14) de Chromobacterium violaceum
Autor:  
  Márcia Neiva   Listar as obras deste autor
Categoria:  
  Teses e Dissertações
Idioma:  
  Português
Instituição:/Parceiro  
  [cp] Programas de Pós-graduação da CAPES   Ir para a página desta Instituição
Instituição:/Programa  
  INPA/GENÉTICA, CONSERVAÇÃO E BIOLOGIA EVOLUTIVA
Área Conhecimento  
  GENÉTICA
Nível  
  Mestrado
Ano da Tese  
  2006
Acessos:  
  148
Resumo  
  Nos últimos anos, em virtude da conclusão do seqüenciamento de vários genomas, várias proteínas e enzimas de interesse biotecnológico têm sido isoladas e caracterizadas para uso em diversas áreas como medicina, pesquisa aplicada, e atividade industrial. A conclusão do seqüenciamento do genoma de Chromobacterium violaceum deu origem à necessidade de caracterizar a funcionalidade dos genes anotados presentes no cromossomo essa bactéria. Em seu genoma foram encontrados várias ORFs (Open reading frames), correspondentes a genes de interesse biotecnológico, e entre eles cinco que codificam quitinases. Esse trabalho se propôs a clonar e expressar as seqüências de DNA correspondentes a essas ORFs, a fim de fornecer subsídios para uma futura caracterização funcional e estrutural dessa enzima para possível utilização em controle biológico ou atividade industrial. Foram selecionadas quatro ORFs cujas sequëncias de DNA foram obtidas por meio de PCR, com iniciadores específicos. Foram utilizadas duas estratégias neste trabalho, a clonagem da seqüência completa dos genes, e outra a a clonagem da região codificadora fusionada com a seqüência da subunidade B da proteína A de Staphylococcus aureus, utilizando sinais de transcrição e tradução de um vetor de expressão conhecido. Com a segunda estratégia foi obtida expressão da seqüência correspondente a ORF CV2736 , cuja proteína foi expressa em altos níveis e apresentou atividade frente ao substrato.
     
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