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Tipo de Mídia:
Texto
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Formato:
.pdf
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Tamanho:
1,18
MB
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Título: |
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Resistência osmótica, congelabilidade e fertilidade do sêmen de garanhões frente a diferentes crioprotetores |
Autor: |
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Antonio Sylvio Lopes De Medeiros
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Categoria: |
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Teses e Dissertações |
Idioma: |
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Português |
Instituição:/Parceiro |
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[cp] Programas de Pós-graduação da CAPES
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Instituição:/Programa |
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UNESP/BOT/MEDICINA VETERINÁRIA |
Área Conhecimento |
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MEDICINA VETERINÁRIA |
Nível |
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Doutorado
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Ano da Tese |
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2007 |
Acessos: |
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283 |
Resumo |
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O estresse osmótico induzido pelos crioprotetores aos espermatozóides
durante o processo de criopreservação é um dos principais fatores que
comprometem a viabilidade espermática. O presente estudo objetivou avaliar a
viabilidade dos espermatozóides de garanhões submetidos ao estresse
osmótico com diferentes tipos de amidas e glicerol. O Experimento I teve como
objetivo estudar a congelabilidade do sêmen de 27 garanhões, quando da
utilização dos crioprotetores dimetilacetamida (DA), metilformamida (MF),
dimetilformamida (DF) e glicerol (GL), onde crioprotetores a base amidas foram
superiores em relação ao glicerol em preservar a motilidade e a integridade da
membrana espermática (p<0,001). Dentre os 27 garanhões selecionou-se, 9
indivíduos de congelabilidade aceitável, 12 indivíduos de congelabilidade não
aceitável quando do uso do GL. No grupo de congelabilidade aceitável não
houve diferença entre os crioprotetores quanto a motilidade total (MT), quanto a
motilidade progressiva (MP) e integridade de membrana (IM). No grupo de
congelabilidade não aceitável as amidas foram sempre superiores ao glicerol
quanto a MT, MP e IM (p<0,001). Entre os animais de congelabilidade aceitável
foram selecionados 4 indivíduos de alta congelabilidade, onde não se observou
diferenças entre os tratamentos amidas em comparação ao glicerol nos
parâmetros de MT, MP e IM (p>0,05). Entre os animais de congelabilidade não
aceitável selecionou-se 6 garanhões, para os quais os tratamentos amidas
foram superiores ao glicerol em todos os parâmetros avaliados (p<0,0001).
No Experimento II, foram utilizados os 4 garanhões de alta congelabilidade e 6
de baixa congelabilidade. Avaliou-se a viabilidade dos espermatozóides de
garanhões submetidos ao estresse osmótico com soluções hipertônicas dos
crioprotetores a base de amidas e Glicerol na concentração de 1 Molar. O
sêmen foi incubado por 10 minutos, em seguida realizou-se uma rediluição
para retorno a isosmolaridade.. Durante o período de incubação nas soluções
hipertônicas observou-se uma queda na MT (12,93±15,22d; 61,53±16,17b;
44,67±22,68c; 41,73±24,28c, DA, MF, DF e GL respectivamente) em relação ao
controle (81,4±9,15a) sendo esta queda mais evidente na solução de DA. Para
o parâmetro integridade de membrana observou-se uma queda nas soluções de DA, MF, DF e GL (48,47±9,49bc, 49,20±8,47bc, 53,07±12,04b, 42,33±12,15c
respectivamente) em relação ao controle (61,87±13,62a), sendo mais
acentuada para o tratamento GL. Quando expostos a condição de
isoosmolaridade os espermatozóides previamente incubados com os
crioprotetores á base de amidas apresentaram uma Motilidade Total superior
(p<0,0001) ao glicerol (66,33±15,03b,72,8±11,43b,66,73±13,44b, 43,33±24,56c
DA, MF, DF e GL respectivamente). Em relação à integridade de membrana
também se observou uma superioridade dos tratamentos amidas (p<0,0001)
em relação ao glicerol (37,67±9,47b, 40,47±8,47b, 38,13±1,65b, 22±13,49c DA,
MF, DF e GL respectivamente). O Experimento III objetivou avaliar a fertilidade
dos espermatozóides de garanhões de Alta e Baixa congelabilidade
submetidos ao estresse osmótico em soluções com crioprotetores a base de
amidas (DA, MF,DF) e GL na concentração de 1 Molar. Utilizou-se 2
garanhões, sendo um garanhão de alta e um de baixa congelabilidade.. Foram
utilizados 250 ciclos de 25 éguas os quais foram subdivididos entre os
tratamentos DA, MF, DF, GL e grupo controle (25 ciclos/tratamento). Os índices
de fertilidade com o garanhão de alta congelabilidade, foram: Grupo Controle
80% (20/25); DA 72% (18/25), MF 80% (20/25), DF 68% (17/25) e GL 60%
(15/25), não havendo diferença estatística (p>0,05). Em relação à taxa de
fertilidade obtida com garanhão de baixa congelabilidade os resultados foram:
Grupo Controle 72%a (18/25); DA 40%b (10/25), MF 44%ab (11/25); DF 32%b
(8/25); GL 0c (0/25). No total das inseminações dos dois garanhões observouse
novamente uma superioridade dos tratamentos amidas em relação ao
tratamento glicerol (p<0,001): Grupo controle 76%a (38/50), DA 56%ab (28/50),
MF 62%ab (31/50), DF 52%abc (26/50), GL 30%c (15/50). Os resultados de
fertilidade obtidos neste experimento demonstraram haver uma diferença entre
indivíduos resistência osmótica dos espermatozóides aos crioprotetores. Esta
sensibilidade ficou evidente nos garanhões da raça Mangalarga Marchador
principalmente quando do uso do Glicerol. Concluímos de forma geral as
amidas induzem a um menor dano osmótico quando comparado ao glicerol, o
que favorece a congelabilidade e fertilidade de sêmen de garanhões que
apresentem resultados ruins quando do uso do Glicerol. |
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